溶。每种蛋白质样品制备两份μ等分试样一份含有还原剂一份不含还原剂。使用至甘氨酸凝胶进行电泳。为了确认在抑制剂存在下相关激酶磷酸化的丧失用洗涤表达突变或的细胞在指定浓度的抑制剂存在下血清饥饿小时并在裂解前用配体刺激分钟。软琼脂集落形成测定将毫升琼脂和培养基接种到未经组
织培养处理的孔板的每个孔中并使其凝固
将总共×个细胞悬浮在μ培养基中并与μ琼脂和培养基混合然后一式三巴哈马企业电子邮件列表份铺板到固化的底层上。将板孵育周使用拍照并通过对集落形成进行定量。使用学生检验进行统计比较。为了评价临床抑制剂对软琼脂集落形成的影响对上述方案进行以下改变将×个细胞悬浮于μ加相关抑制剂的培养基中然后添加琼脂溶液并铺板。异种
移植研究所有动物实验均按照有关动物安全的机构
指南进行。免疫功能低下的小鼠被注射稳定表达外源野生型或突变 开曼群岛电话号码列表 型的细胞。只小鼠的队列被注射在每个细胞类型的三个位点每个位点万个细胞并且观察小鼠直至肿瘤体积达到至。然后每天用的或载体对照治疗小鼠持续两周并在治疗期间测量肿瘤大小。依赖性和抑制剂研究在含有和嘌呤霉素的培养基中选择表达每种突变构建体的细胞。
